Музей расположен в старинном особняке, построенном в 1896 году в центре станицы на торговой улице напротив Знаменской церкви (освященной в 1817 году) и принадлежавшем купцу 1-й гильдии Ф.К. Никитину. Дом представляет собой историческую ценность как уникальный памятник архитектуры казачьего зодчества.
Музей истории донских казаков является хранителем самобытных традиций донского казачества, вобравших в себя все лучшее, чем славится донской край. В 6 залах музея развернуты постоянно действующие экспозиции: «История и культура Среднего Дона» (период с III тыс. до н. э. по I четверть ХХ в.), «Казачья горница» — зал, посвященный семейному быту казаков, зал Воинской Славы, посвященный Великой Отечественной войне 1941–1945 гг.
Выставочный зал знакомит посетителей с живописными работами волгоградских и местных художников, а также здесь проходят ежегодные выставки декоративно-художественных промыслов. Зал-каюта В.М. Шукшина переносит посетителей к событиям съемок фильма по роману М.А. Шолохова «Они сражались за Родину». В интерьере зала «Купеческая гостиная» переплетаются два периода истории — начало ХХ века и современность.